## 细胞简介

HL-1心肌细胞系源于一只成年雌性C57BL/6J小鼠中切除的皮下肿瘤,该小鼠是转基因小鼠,携带心房利钠因子启动子与SV40区域的融合基因。这些细胞能够持续分裂、自发收缩,并保持已分化的心脏表型。HL-1细胞具备良好的传代能力,且不会丧失其特异性的心肌细胞表型,广泛应用于研究正常心肌细胞在信号转导、细胞代谢及转录调控等功能,以及体外模拟缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等病理条件。
## 解锁心脏研究的钥匙
HL-1细胞系已成为科学家们探讨心脏生理、病理与药物筛选的重要工具。然而,HL-1细胞的培养并非易事。本文将揭示HL-1细胞培养的关键细节,并提供一些重要的注意事项,帮助您在心脏研究领域迈出稳健的步伐。
### 一、HL-1细胞培养的培养细节
#### 1. 培养基准备
HL-1细胞的生长依赖于特定的培养基,该培养基通常由以下成分组成:
- Claycomb培养基:HL-1细胞的标准培养基,需添加10%胎牛血清(FBS)。(Sigma货号:51800C)
- 添加剂:去甲肾上腺素(0.1mM,货号:CSP209)、L-谷氨酰胺(2mM,货号:CSP012)。
- 推荐使用中乔新舟完全培养基(货号:ZM0920)。
#### 2. 细胞培养注意事项
- HL-1细胞贴壁性较差,培养过程中可能出现圆形细胞,建议使用Corning的高吸附cell binding细胞培养瓶(货号:3289)或明胶基质CSP132预包被的培养瓶,培养前在37°C孵育至少1小时。
- 细胞培养增长至约80%时即可传代,细胞消化时间约为8-15分钟,观察细胞成纤维样细胞收缩分离即可终止消化。
- 培养基在2-3天内不需要更换,黑色或深色的变化为正常现象。
- 为保持培养基的新鲜,建议完全培养基避光保存,以减少添加剂的降解。
- 严格执行无菌操作,定期检测细胞是否受到支原体污染,必要时使用支原体清除试剂处理。
#### 3. 细胞信息
- 细胞特征:HL-1细胞呈现典型的梭形或多边形,部分细胞贴壁不牢固。
- 倍增时间:约35-50小时,生长速度较慢。(80%汇合度的T25瓶需要4-6天接种至两个T25培养瓶)
- 换液频率:每周2-3次。
### 二、HL-1细胞的复苏与传代
#### 1. 细胞复苏
- 从液氮中取出冻存的HL-1细胞,快速放入37°C水浴中解冻后转移至温热的培养基中轻轻混匀。(15ML离心管3ml)
- 以1000rpm离心5分钟,弃去上清液后用新鲜培养基重悬细胞。(T25添加7ml)
- 将细胞接种于预先涂覆有明胶的培养皿中,置于37°C、5% CO₂的培养箱中培养。
- 由于细胞复苏后的贴壁率较低,决定以冻存管的形式出售HL-1细胞。
#### 2. 细胞传代
- 细胞密度达到80%-90%时即可传代,弃去旧培养基,用PBS轻轻洗涤细胞。
- 加入0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C消化8-15分钟,观察至细胞脱落。
- 用完全培养基终止消化,轻轻吹打细胞至单细胞悬液,根据1:2或1:3的比例将细胞接种至新的明胶包被培养皿中。
#### 3. 细胞冻存
- 选择对数生长期的细胞,消化并收集细胞悬液,以1000rpm离心5分钟后弃去上清。
- 用冻存液(90% FBS+10% DMSO)重悬细胞,分装至冻存管中,采用程序降温法保存至液氮中。
### 三、HL-1细胞的应用前景
HL-1细胞因其独特的心肌细胞特性,在心血管研究中拥有广泛的应用价值:
- 疾病模型构建:通过基因编辑或药物处理,模拟心肌肥厚、心律失常等疾病状态。
- 药物筛选:用于评估药物对心肌细胞的影响,加速新药研发进程。
- 分子机制研究:揭示心脏发育、代谢及信号通路的分子机制。
尽管HL-1细胞的培养面临一定挑战,只要掌握正确的操作方法与注意事项,便能最大程度发挥其在心脏研究中的潜力。无论探索心脏疾病的奥秘,还是开发新型治疗药物,尊龙凯时提供的HL-1细胞将成为您科研路上的得力助手。让我们一起用心呵护这些“跳动”的细胞,为心血管健康贡献一份力量!