## 细胞简介

HL-1心肌细胞系源于一只成年雌性C57BL/6J小鼠中切除的皮下肿瘤，该小鼠是转基因小鼠，携带心房利钠因子启动子与SV40区域的融合基因。这些细胞能够持续分裂、自发收缩，并保持已分化的心脏表型。HL-1细胞具备良好的传代能力，且不会丧失其特异性的心肌细胞表型，广泛应用于研究正常心肌细胞在信号转导、细胞代谢及转录调控等功能，以及体外模拟缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡和缺血-再灌注等病理条件。

## 解锁心脏研究的钥匙

HL-1细胞系已成为科学家们探讨心脏生理、病理与药物筛选的重要工具。然而，HL-1细胞的培养并非易事。本文将揭示HL-1细胞培养的关键细节，并提供一些重要的注意事项，帮助您在心脏研究领域迈出稳健的步伐。

### 一、HL-1细胞培养的培养细节

#### 1. 培养基准备

HL-1细胞的生长依赖于特定的培养基，该培养基通常由以下成分组成：

• Claycomb培养基：HL-1细胞的标准培养基，需添加10%胎牛血清（FBS）。(Sigma货号：51800C)
• 添加剂：去甲肾上腺素（0.1mM，货号：CSP209）、L-谷氨酰胺（2mM，货号：CSP012）。
• 推荐使用中乔新舟完全培养基（货号：ZM0920）。

#### 2. 细胞培养注意事项

• HL-1细胞贴壁性较差，培养过程中可能出现圆形细胞，建议使用Corning的高吸附cell binding细胞培养瓶（货号：3289）或明胶基质CSP132预包被的培养瓶，培养前在37°C孵育至少1小时。
• 细胞培养增长至约80%时即可传代，细胞消化时间约为8-15分钟，观察细胞成纤维样细胞收缩分离即可终止消化。
• 培养基在2-3天内不需要更换，黑色或深色的变化为正常现象。
• 为保持培养基的新鲜，建议完全培养基避光保存，以减少添加剂的降解。
• 严格执行无菌操作，定期检测细胞是否受到支原体污染，必要时使用支原体清除试剂处理。

#### 3. 细胞信息

• 细胞特征：HL-1细胞呈现典型的梭形或多边形，部分细胞贴壁不牢固。
• 倍增时间：约35-50小时，生长速度较慢。（80%汇合度的T25瓶需要4-6天接种至两个T25培养瓶）
• 换液频率：每周2-3次。

### 二、HL-1细胞的复苏与传代

#### 1. 细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的HL-1细胞，快速放入37°C水浴中解冻后转移至温热的培养基中轻轻混匀。(15ML离心管3ml)
• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清液后用新鲜培养基重悬细胞。（T25添加7ml）
• 将细胞接种于预先涂覆有明胶的培养皿中，置于37°C、5% CO₂的培养箱中培养。
• 由于细胞复苏后的贴壁率较低，决定以冻存管的形式出售HL-1细胞。

#### 2. 细胞传代

• 细胞密度达到80%-90%时即可传代，弃去旧培养基，用PBS轻轻洗涤细胞。
• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，37°C消化8-15分钟，观察至细胞脱落。
• 用完全培养基终止消化，轻轻吹打细胞至单细胞悬液，根据1:2或1:3的比例将细胞接种至新的明胶包被培养皿中。

#### 3. 细胞冻存

• 选择对数生长期的细胞，消化并收集细胞悬液，以1000rpm离心5分钟后弃去上清。
• 用冻存液（90% FBS+10% DMSO）重悬细胞，分装至冻存管中，采用程序降温法保存至液氮中。

### 三、HL-1细胞的应用前景

HL-1细胞因其独特的心肌细胞特性，在心血管研究中拥有广泛的应用价值：

• 疾病模型构建：通过基因编辑或药物处理，模拟心肌肥厚、心律失常等疾病状态。
• 药物筛选：用于评估药物对心肌细胞的影响，加速新药研发进程。
• 分子机制研究：揭示心脏发育、代谢及信号通路的分子机制。

尽管HL-1细胞的培养面临一定挑战，只要掌握正确的操作方法与注意事项，便能最大程度发挥其在心脏研究中的潜力。无论探索心脏疾病的奥秘，还是开发新型治疗药物，尊龙凯时提供的HL-1细胞将成为您科研路上的得力助手。让我们一起用心呵护这些“跳动”的细胞，为心血管健康贡献一份力量！